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          标准物质中黄制 全粉曲霉玉米一毒素的研
          2025-05-14 01:42:45

          目的玉米研制研制玉米全粉中黄曲霉毒素B1成分分析的标准物质。方法采用高效液相色谱法对玉米全粉中黄曲霉毒素B1候选物进行均匀性检验、全粉曲霉稳定性考察,中黄准物质选取8家具有较高检测水平的实验室开展多家实验室联合定值。结果均匀性检验的毒素方差分析结果显示F统计值均匀性,可在常温(<25℃)下保存,在低于60℃的条件下运输。玉米全粉中黄曲霉毒素b1标准物质定值结果为(27±3)μg>

          0引言

          黄曲霉毒素B1(aflatoxinB1)是全粉曲霉二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物,含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素)。黄曲霉毒素B1是中黄准物质已知的化学物质中致癌性最强的一种,被世界卫生组织列为I类致癌物。其广泛存在于棉籽、毒素玉米、玉米研制花生、全粉曲霉坚果类食品和饲料中,中黄准物质严重威胁人类及禽畜的健康,受到世界各国的广泛关注。为控制黄曲霉毒素的危害,我国GB2761—2017《食品中真菌毒素限量》规定粮油及其制品中黄曲霉毒素B1的限量值,其中玉米、玉米面及玉米制品限量值为20μg/kg。黄曲霉毒素B1的检测方法很多,主要有薄层色谱法、酶联免疫法、胶体金试纸条法、高效液相色谱法和液相色谱–质谱联用法等。为确保检测结果的准确性、可靠性,需要具有溯源性的高准确度的黄曲霉毒素B1基体标准物质作为日常质控方式。

          近年来随着检测技术的提高及真菌毒素检测量的增加,对测量结果可靠性和溯源性需求日益增长。标准物质可用于量值溯源及实验室质量保证能力的评价,在实验室的检验活动中发挥着重要作用。根据标准物质数据库检索,真菌毒素的相关标准物质无论从品种上还是从数量上都无法满足检测需要。因此有必要开展系统的真菌毒素类标准物质的研制工作,对保证检测结果准确可靠性具有重要意义。本研究通过对全国代表性区域玉米进行筛查,选择适宜的玉米候选物,经粉碎、均匀化技术、均匀性和稳定性检验及多家实验室定值,研制成玉米全粉中黄曲霉毒素B1基体标准物质,以期可为粮油及其制品中黄曲霉毒素B1检测质量控制、校准测量仪器、考核人员操作水平等提供基准物质,对我国粮食质量安全控制具有重要的意义。

          1材料与方法

          1.1仪器与试剂

          Agilent1260高效液相色谱仪(美国Agilent公司);AutoEVA-60全自动浓缩氮吹仪;固相萃取仪(上海安谱实验科技股份有限公司);GT10-1高速台式离心机(北京时代北利离心机有限公司);HY-2调速多用振荡器(常州国华电器有限公司)。

          甲醇、乙腈(色谱纯,德国Merk公司);氯化钠(分析纯,中国医药集团有限公司);超纯水(香港Waston公司);AflaTest免疫亲和柱(3mL,美国VICAN公司);0.2mPTFE膜针头过滤器(美国PALL公司);有证标准物质GBW(E)100302甲醇中黄曲霉毒素B1、玉米全粉空白(国家粮食和物资储备局科学研究院)。

          1.2实验方法

          1.2.1标准物质的制备

          根据JJF1006—1994《一级标准物质技术规范》要求,从全国代表性区域样品筛选出指标含量满足要求的玉米候选样品,候选样品经除杂、粉碎、过筛、混合,用避光箔袋真空封装,按100g/袋包装,共包装500个单元,进行辐照处理,(20±5)℃保存。

          1.2.2均匀性检验

          均匀性是标准物质的基本属性,用于描述标准物质特性的空间分布特征。在标准物质的研制(生产)过程中必须进行均匀性评估。均匀性检验按照JJF1343—2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》技术规范要求,从已经分装好的标准物质中抽取15个单元进行均匀性检验。检验方法与定值方法相同,每袋重复测定3次。

          1.2.3稳定性考察

          稳定性是标准物质的另一个基本属性,用于描述标准物质的特性值随时间变化的性质,即描述标准物质特性的时间分布特征。标准物质的稳定性包括长期稳定性和短期稳定性2部分。长期稳定性主要考察储存条件下的稳定性,本标准物质储存于室温(20±5)℃避光保存的条件下,分别在第0、1、2、3、6个月进行实验,每次选取2个包装单元包装单元。

          短期稳定性实验模拟运输过程中出现的极端环境进行考察,将样品置于60℃条件下,分别在0、1、3、5、7d进行监测,测定方法与定值方法相同。

          1.2.4定值方法研究

          标准物质样品用甲醇提取,以免疫亲和柱净化富集,采用液相色谱法对玉米全粉中黄曲霉毒素B1进行定值。

          前处理方法:称取玉米粉(5g,精确至0.001g)于50mL离心管中,加入1g氯化钠,准确加入20mL70%甲醇水,涡旋提取30min,7000r/min离心5min,取2mL上清液于洁净50mL离心管中,加入18mL水稀释。将上述样液过免疫亲和柱,上样后加10mL水淋洗2次,淋洗后用真空泵抽干亲和柱,用2mL甲醇洗脱亲和柱,真空泵抽干后,用氮气吹干,用1mL流动相溶液定容,过0.22μm滤膜,待上机检测。

          液相色谱条件:Agilent1260高效液相色谱仪配光化学衍生器;AgilentZORBAXEclipsePlusC18液相色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),柱温:40ºC;流动相:A相:乙腈:甲醇(V:V=1:1),B相:水;A:B=35:65(V:V),等梯度洗脱;流速为1.0mL/min,进样量为50µL;激发波长为360nm,发射波长为440nm。

          1.2.5多家实验室联合定值

          选择具有中国合格评定国家认可委员会/国家认证认可监督管理委员会等计量认可的实验室为协作定值单位。定值过程中使用的仪器设备、容量器具都通过了计量检定或校准。协助定值单位使用具有量值溯源的标准溶液绘制工作曲线,并用加标回收进行质量监控,确保量值的溯源性和准确性。

          声明:本文所用图片、文字来源《食品安全质量检测学报》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系删除。

          相关链接:黄曲霉毒素氯化钠甲醇

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              3)针对具体风水等问题进行求助或咨询;
              4)问自己或他人的八字、六爻、星盘、手相、面相、五行缺失,包括通过占卜方法问婚姻、前程、运势,东西宠物丢了能不能找回、取名改名等;


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              1)以各种夸张、猎奇、不合常理的表现手法等行为来诱导用户;
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              3)使用夸张标题,内容与标题严重不符的。


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              2)粉丝互撕谩骂、拉踩引战、造谣攻击、人肉搜索、侵犯隐私
              3)鼓动「饭圈」粉丝攀比炫富、奢靡享乐等行为
              4)以号召粉丝、雇用网络水军、「养号」形式刷量控评等行为
              5)通过「蹭热点」、制造话题等形式干扰舆论,影响传播秩序


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